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        PCR 實驗室通風空調設計探討
        發布時間:2022-12-08瀏覽次數:19

        【摘 要】簡單描述了醫院 PCR 實驗室的平面布局及工藝流程;總結了各規范標準與實際使用的需求,提供了PCR實驗室各功能房間的空調通風室內設計參數;并對各區域的空調、通風設計進行了詳細的介紹。


        PCR 技術自 1985 年問世以來,憑其靈敏度高、特異性強、方便快捷、對樣品要求低等優點,可測出普通檢驗難以檢測出的病毒,已廣泛應用于醫院的臨床診斷和各防疫檢測部門的疫病診斷。但是,這種實驗需要有能保證絕對安全、配置合理的實驗室和非常規范的操作為前提。近年來對臨床基因擴增檢驗實驗室的建設越來越得到重視,因其對檢測結果的可靠性、準確性和安全性起到至關重要的作用。

        建設 PCR 實驗室首先要有規范的管理和內部質量控制流程,其次是分析各醫院實驗室處理的主要疾病對象,根據病原的生物危害程度、每天實驗的數量等,設置相應的通風空調系統。其中要著重考慮實驗中交叉污染的控制、室內人員的職業保護和排出物對室外環境的無害化處理。

        本文探討了公立醫院在有限的資源下,采取經濟合理的方式,建設符合國家相關規范要求,又具有一定前瞻性,對室內的醫務人員有所保護,又不對室外環境造成污染的 PCR實驗室。供讀者參考。

         

        一、PCR 實驗室概述
        SUMMARY

        PCR (Polymerase Chain Reaction) 即聚合酶鏈式反應,又稱無細胞分子克隆系統或體外酶促基因擴增法。其基本原理類似于 DNA 的天然復制過程,是在模板 DNA、引物和 4種脫氧核苷酸存在的條件下,依賴于 DNA 聚合酶的酶促合反應,將待擴增的DNA片段與其兩側互補的寡核苷酸鏈引物經“高溫變性——低溫退火——引物延伸”三步反應的多次循環,使 DNA 片段在數量上呈指數增加,該技術可以將極微量的靶DNA 特異地擴增上百萬倍,從而在短時間內獲得所需的大量特定基因片段,因此能在臨床上檢測單分子 DNA或每 10 萬個細胞中僅含 1 個靶 DNA 分子的樣品。

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        二、PCR 實驗室平面布局
        LAY OUT

        根據《臨床基因擴增檢驗實驗室基本設置標準》規定,臨床基因擴增檢驗實驗室需要設置試劑儲存和準備區、標本制備區、擴增反應混合物配制和擴增區、擴增產物分析區等四個區域。如使用全自動分析儀,區域設置可以適當合并。

        雖然 PCR 實驗室的四個功能分區是固定的,但各醫院在實際布置中卻千差萬別,其主要布置形式有分散式和集中式兩種。

        分散式:各實驗用房彼此相距較遠,呈分散布置形式。各實驗之間不易相互干擾。

        集中式:完成 PCR 四個實驗過程的實驗用房相鄰布置,形成集中、獨立的實驗區域。每個實驗室應設置獨立緩沖間、實驗室間應設置帶消毒裝置的傳遞窗。

        在理想情況下,PCR 實驗室緩沖間內,可設置正壓,使室內空氣不流向室外,室外空氣不流向室內。若房間進深允許,可設 PCR 內部專用走廊。在減少室內外空氣交換方面,緩沖間比專用走廊更有意義。試劑和標本通過機械連鎖傳遞窗傳遞,保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染,達到人、物分流。

        三 .PCR 實驗室的主要功能和設備配置
        FUNCTION AND EQUIPMENT

        1. 試劑儲存和準備區

        該實驗區主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于標本制作的材料應直接運送至該區,不得經過其他區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。

        2. 標本制備區

        該區域主要進行的操作為臨床標本的保存、核酸 (RNA、DNA) 提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA 的合成。

        本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。

        對具有潛在傳染危險性的材料,必須在生物安全柜內開蓋,并有明確的樣本處理和滅活程序。 

        3. 擴增反應混合物配制和擴增區 

        該區域主要進行的操作為DNA或cDNA 擴增。此外,已制備的 DNA 模板和合成的 cDNA( 來自樣本制備區 ) 的加入和主反應混合液 ( 來自試劑貯存和制備區 ) 制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式 PCR 測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。

        手術室凈化系統。 

        微信圖片_20221208111335.jpg

                本文部分摘自公眾號(愛德凈化供氧)。







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